伪狂犬病病毒UL24基因的原核表达及抗UL24蛋白抗体的制备

• 作者: 于春梅 周斌 曹瑞兵 李斐 李鹏 苏鑫铭 郑其升 陈溥言
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 伪狂犬病毒 UL24基因 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4371字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2007.09.003

摘要

为了给伪狂犬病病毒(PrV)UL24蛋白的细胞定位和功能研究提供参考依据,据GenBank公布的PrV UL24基因序列(登录号NC006151)设计1对引物,以质粒pUL24-GFP为模板,用PCR方法扩增出部分缺失的基因片段mUL24 (modified UL24).将mUL24片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达载体pET-UL24.阳性质粒转化宿主菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白 (His)6-UL24以包涵体的形式获得表达.用纯化后的pET-UL24融合蛋白免疫家兔,ELISA分析表明,在血清效价达到1∶2 560以上,Western-blot分析制备的抗体可以和pET-UL24表达产物发生反应,具有良好的免疫特异性.