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摘要:
目的:构建真核表达重组质粒pEGFP-N1-PLZF,并了解其在大鼠精原细胞中的融合蛋白表达情况.方法:参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF),将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,并用双酶切、测序进行鉴定;将重组质粒用脂质体转染的方法导入精原细胞中,观察有无荧光的表达及用Western blot检测蛋白表达情况.结果:实验从大鼠睾丸组织中获取了编码plzf基因的全序列cDNA,产生了2 kb的目的插入片段,与pEGFP-N1载体连接后经酶切电泳鉴定及DNA测序证实序列正确;重组质粒转染精原细胞24 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,并用Western 1blot:检测到106 kD目的蛋白的表达.结论:新构建的重组质粒pEGFP-N1-PLZF通过鉴定,结构正确.转染到精原细胞后能在其中表达,发挥功能,为后续研究奠定了基础,对研究PLZF调控精原细胞增殖和分化机制具有重要的意义.
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文献信息
篇名 大鼠pEGFP-PLZF真核载体的构建及在精原细胞中的表达
来源期刊 南京医科大学学报(自然科学版) 学科 生物学
关键词 早幼粒细胞白血病锌指蛋白 重组质粒 绿色荧光蛋白 精原细胞
年,卷(期) 2007,(8) 所属期刊栏目 基础医学研究
研究方向 页码范围 831-834,842,封3
页数 6页 分类号 Q786
字数 3409字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1007-4368.2007.08.015
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 曾甫清 华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科 253 1463 17.0 24.0
2 叶哲伟 华中科技大学同济医学院协和医院骨科 94 434 10.0 17.0
3 夏伟 华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科 18 83 5.0 8.0
4 白杨 华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科 28 79 5.0 8.0
5 邬喻 华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科 9 62 5.0 7.0
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研究主题发展历程
节点文献
早幼粒细胞白血病锌指蛋白
重组质粒
绿色荧光蛋白
精原细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
南京医科大学学报(自然科学版)
月刊
1007-4368
32-1442/R
大16开
南京市汉中路140号
28-61
1956
chi
出版文献量(篇)
8066
总下载数(次)
11
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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