HGF非融合蛋白真核表达载体的构建及其在骨骼肌细胞中的表达

• 作者: 孙晋津 郭亮 陈传贵 陈剑秋
• 来源期刊: 临床军医杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞生长因子 细胞转染 骨骼肌细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-3826.2007.01.002

摘要

目的 构建以HGF为目的基因、以EGFP为报告基因的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,并观察HGF基因在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中的表达.方法 利用BamH I单酶切质粒pcDNA3-HGF,得到HGF基因片段,将其正向插入到真核表达载体pCMV-IRES-EGFP的CMV后方BamH I的单克隆位点.脂质体介导转染至原代培养的大鼠骨骼肌细胞,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用ELISA法检测HGF的表达情况.结果 构建了HGF的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,转染原代培养的大鼠骨骼肌细胞24～72 h 后,见30%的细胞表达EGFP.ELISA检测细胞培养液证实转染后第1天即有HGF的表达,第4天HGF浓度为(5 402.0±227.9 )ng/L.结论 成功构建了非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,其在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中能有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈剑秋	天津医科大学第二医院外科	93	403	10.0	14.0
2	孙晋津	天津医科大学第二医院外科	30	130	6.0	10.0
3	郭亮	解放军军事交通学院卫生处	5	4	1.0	1.0
4	陈传贵	天津医科大学第二医院外科	12	33	2.0	5.0