食品中单核细胞增生李斯特菌实时荧光PCR快速检测方法的建立

• 作者: 徐德顺 查赟峰
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 食品 李斯特菌 快速PCR
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 380-383
• 页数: 4页
• 分类号: R378
• 字数: 3370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.04.019

摘要

目的 利用荧光定量PCR技术,建立食品中单核细胞增生李斯特菌污染的快速敏感特异的检测方法.方法 以单核细胞增生李斯特菌的-hlyA基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以单核细胞增生李斯特菌菌株,提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和退火温度,以单核细胞增生李斯特菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性.并初步应用于样品的检测.结果 本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.8μmol/L,0.6μmol/L,退火温度为60℃时,具有良好的特异性和敏感性.在10株相关菌株的检测中,除单核细胞增生李斯特菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性.在纯菌条件下,定量检测低限19cfu/ml.稳定性分析表明:同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均小于5%.检测样品结果显示Real-time PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便.结论 该方法特异性强,稳定性高,操作简便快捷,适应食品微生物检验发展需要,具有较大的推广及应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐德顺		59	129	6.0	9.0
2	查赟峰		21	53	4.0	7.0