重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体的构建及转染兔骨髓基质干细胞的实验研究

• 作者: 吕松岑 田坤 薛震 赵金东
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人骨形态发生蛋白-7 基因转染 骨髓基质干细胞
• 年，卷（期）: 2007,（20）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1570-1573
• 页数: 4页
• 分类号: R687
• 字数: 3666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8478.2007.20.016

摘要

[目的]构建人骨形态发生蛋白-7(human bone morphogenetic protein-7,hBMP-7)基因真核表达载体,评价其转染兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的诱导成骨能力.[方法]从人类胎盘组织中克隆出hBMP-7基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,成功构建了重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体;从兔骨髓中分离培养BMSCs,分为3组:A pcDNA3.1-hBMP-7转染组;B空载体pcDNA3.1转染组;C未转染组.使用RT-PCR、免疫组织化学等方法检测hBMP-7在BMSCs中的表达.检测各组细胞碱性磷酸酶,胶原,骨钙蛋白合成情况.[结果]RT-PCR、免疫组织化学检测显示经hBMP-7转染的BMSCs中有BMP-7表达.经hBMP-7转染BMSCs的碱性磷酸酶于转染后第2 d显著增高,到第8 d达到最高;经hBMP-7转染的BMSCs合成胶原、骨钙蛋白能力也显著提高,与转染空载体、未转染的BMSCs相比有显著性差异(P＜0.05).[结论]成功构建了pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体;外源的hBMP-7基因可在兔BMSCs中充分、高效的表达,并且这种外源性hBMP-7基因具备了促进兔骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力,这为hBMP-7的基因治疗提供了坚实的理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕松岑	哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科	44	359	11.0	18.0
2	田坤	哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科	3	34	2.0	3.0
3	薛震	哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科	11	89	3.0	9.0
4	赵金东	哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科	3	75	3.0	3.0