人类8型疱疹病毒小衣壳蛋白ORF65基因的原核表达及其生物信息学分析

• 作者: 何斌 何方平 克迪亚 温浩 热依汗·谢以提 王星 阿斯哈尔
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人类疱疹病毒8型 小衣壳蛋白ORF65基因 原核表达 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 100-103
• 页数: 4页
• 分类号: R752|R34
• 字数: 2335字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5551.2007.02.003

摘要

目的:构建人类8型疱疹病毒(HHV-8)小衣壳蛋白(ORF65)基因重组原核表达质粒并诱导表达,获得其重组融合蛋白.方法:软件设计引物,在引物两端添加特异性酶切位点,以pGEM-Teasy/ORF65为模板,PCR扩增基因序列,克隆入原核表达载体pET-41a中,构建原核表达质粒pET41a-ORF65,转化大肠杆菌(E.coli) DH5x,经酶切、测序鉴定其插入序列的正确性,转入E.coli BL21(DE3),并诱导表达,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法以及序列分析软件DNAMAN 5.0、Vector NTI Suite 6、Primer Primier 5对表达蛋白进行生物信息学分析.结果:测序结果表明所构建pET41a-ORF65原核表达质粒连接正确,SDS-PAGE表明ORF65基因获得成功表达,生物信息学分析显示该蛋白含有1个N 糖基化位点,2个蛋白激酶C磷酸化位点,4个胆碱激酶Ⅱ磷酸化位点,4个N 肉豆蔻酰化位点,1个酰胺化位点.BlastP数据库的相似性检索发现有与之有较高同源性的蛋白.结论:成功表达HHV-8病毒小衣壳蛋白ORF65,该蛋白与疱疹病毒衣壳蛋白的同源性较高,是疱疹病毒衣壳蛋白家族中的一员.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温浩	新疆医科大学第一附属医院中心实验室	312	1990	21.0	28.0
2	何方平	新疆医科大学感染性疾病科	31	127	7.0	8.0
3	王星	新疆医科大学第一附属医院中心实验室	33	131	6.0	9.0
4	热依汗·谢以提	新疆医科大学第一附属医院临检中心	5	7	2.0	2.0
5	克迪亚	新疆医科大学第三附属医院检验科	1	1	1.0	1.0
6	阿斯哈尔	新疆医科大学黄河路中医院戒毒中心	7	28	3.0	5.0