禽流感病毒4个亚型一步法多重RT-PCR检测方法研究

• 作者: 侯义宏 吕建强 张晓臣 朱中武 林祥梅 梅琳 贾广乐 钱永华 韩雪清
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感 病毒检测 多重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: S851.34+7.201|S852.65+9.5
• 字数: 3461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2007.08.007

摘要

为了建立简便、快速的AIV检测方法,根据禽流感病毒H5、H7、H9亚型HA基因和N1亚型NA基因的保守序列,设计了4对RT-PCR引物,对H5、H7、H9、N1 4个亚型进行了多重RT-PCR扩增,通过多重RT-PCR敏感性和特异性试验,建立了多重RT-PCR检测方法;应用所建立的多重RT-PCR方法和病毒分离的经典方法对395份(4省20多个地区)口岸检样进行了平行检测,并对其检测结果进行了比较.结果表明,H5、H7、H9、N1 4个亚型的扩增产物大小分别为380,641,493和328 bp,对NDV、IBV、ARV、IBDV、MDV、FPV扩增均为阴性,平行检测结果完全吻合,说明所建立的多重RT-PCR检测方法具有较好的敏感性和特异性.