日本血吸虫乳酸脱氢酶原核表达、纯化及鉴定

• 作者: 余新炳 吕刚 吴忠道 徐劲 李艳文 胡旭初 黄灿
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 乳酸脱氢酶 原核表达 纯化 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1242-1244
• 页数: 3页
• 分类号: R184
• 字数: 3208字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-0580.2007.10.031

摘要

目的 原核表达日本血吸虫乳酸脱氢酶(SjLDH),对表达产物进行纯化及生物活性鉴定.方法 将SjLDH编码序列克隆入pET-28a原核表达载体并转染大肠埃希菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后亲和层析法对表达产物进行纯化,并用聚丙烯酰胺变性凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western blot)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、酶活性染色及活性测定进行鉴定.结果 成功构建pET28a-SjLDH重组质粒并在大肠埃希菌中获得可溶性表达,亲和层析纯化表达产物.SDS-PAGE及Western Blot结果显示,表达及纯化产物分子量约36kDa,与SjLDH理论分子量相符.ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,酶活性染色表明重组蛋白具有乳酸脱氢酶活性,活性单位为379 U/mg.结论 成功进行SjLDH的原核表达并获得纯化的重组蛋白,重组蛋白具有良好的免疫原性及酶活性,为研究SjLDH的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学基础医学寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	吴忠道	中山大学基础医学寄生虫学教研室	171	835	14.0	21.0
3	徐劲	中山大学基础医学寄生虫学教研室	104	568	13.0	17.0
4	胡旭初	中山大学基础医学寄生虫学教研室	108	574	13.0	17.0
5	吕刚	海南医学院寄生虫学教研室	54	174	6.0	10.0
9	黄灿	中山大学基础医学寄生虫学教研室	22	139	6.0	11.0
10	李艳文	中山大学基础医学寄生虫学教研室	2	6	2.0	2.0