结核分支杆菌LprG基因的克隆、表达及纯化

• 作者: 张欣 张荣波 赵金存
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分支杆菌(MTB) LprG基因 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1420-1421
• 页数: 2页
• 分类号: R3
• 字数: 2340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2007.09.020

摘要

目的 在大肠杆菌中重组表达MTB LprG基因,纯化回收,为进一步研究其在结核病诊断中的价值奠定基础.方法 从MTB H37Pv基因组中PCR扩增出MTB LprG基因,克隆到pEASY T1载体中,经序列测定后,再亚克隆到表达载体pET28a(+)中,转化入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,Western-blot分析鉴定,采用Ni-NTA柱纯代LprG蛋白.结果 扩增产物序列无突变,重组表达载体pET28a(+)-LprG酶切鉴定正确,LprG蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达量约占菌体总蛋白的38%左右,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析在27 kDa处见到目的蛋白条带,经Ni-NTA柱纯化后,得到纯度较高的该蛋白.结论 构建了LprG基因的重组表达载体,获得了纯化的蛋白,为以后研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张荣波	安徽理工大学医学院病原生物学教研室	86	220	8.0	9.0
2	张欣	安徽理工大学医学院病原生物学教研室	10	23	2.0	4.0
3	赵金存	北京大学医学部免疫系	4	29	2.0	4.0