结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘杨 宋纪伟 时坤 曾范利 李健明 杜锐
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 结核分支杆菌 Rv3117基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: S852.618
• 字数: 2566字
• 语种: 中文

摘要

以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800 bp的DNA片段.将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117.以EcoR Ⅰ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGEX-4T-1原核表达载体,并将纯化的Rv3117基因亚克隆至pGEX-4T-1中,构建出原核重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3117.将pGEX-4T-1-Rv3117重组质粒转化至感受态E.coli BL21中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30ku目的蛋白带.Western blot分析结果显示,该蛋白能与抗结核分支杆菌阳性血清发生特异性反应.研究结果为结核病临床诊断抗原的筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾范利	吉林农业大学中药材学院	44	128	6.0	9.0
2	时坤	吉林农业大学中药材学院	63	149	6.0	9.0
3	李健明	吉林农业大学中药材学院	39	74	5.0	6.0
4	杜锐	吉林农业大学中药材学院	86	407	10.0	16.0
6	刘杨	吉林农业大学动物科学技术学院	8	8	2.0	2.0