SARS冠状病毒Mc区克隆及序列分析

• 作者: 刘志伟 赵卫 龙北国
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SARS病毒 Mc蛋白 序列分析 克隆
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1785-1787
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2389字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2007.12.004

摘要

目的:构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)GD322株M基因膜内区(Mc区)重组表达质粒,并对目的序列进行序列分析.方法:根据GenBank中公布的SARS-CoV Tor2株M基因序列,设计一对引物,采用RT-PCR法从SARS-CoV GD322株基因组中扩增Mc区,克隆至pET-32a(+)载体中,转化大肠杆菌BL21后测序,利用Clustal X分析所测序列翻译的氨基酸与81株SARS-CoV Mc区翻译的氨基酸序列的差异.结果:测序结果表明该区与Tor2株对应核苷酸序列同源性为100%.与已收集的81株SARS-CoV Mc区所译氨基酸(Mc蛋白)相比,与77株(占95.1%)Mc蛋白完全同源,与4株(占4.9%)仅有一个氨基酸改变.结论:本试验成功构建SARS-CoV Mc区重组表达质粒;SARS-CoV各毒株间Mc蛋白氨基酸序列差异极小,提示利用任一毒株Mc蛋白制备单抗和疫苗具有普遍意义.