PCV2·ORF2基因片段在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 于康震 曹永长 毕英佐 王宪文 谢青梅
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2 表达
• 年，卷（期）: 2007,（23）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 7117-7118,7121
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3385字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.23.028

摘要

[目的]为了研究PCV2-ORF2基因片段在大肠杆菌中的表达与纯化.[方法]用PCR方法扩增PCV2 ORF2基因3'端片段,PCR产物经酶切后与经同样处理过的pET32a质粒连接,构建重组质粒.重组质粒经PCR和酶切鉴定并测序后,转化BL21感受态细胞;重组菌液用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.[结果] ORF2基因在大肠杆菌中正确表达,表达的融合蛋白的分子量约为33 ku;在37 ℃、1 mmol/L浓度下,诱导时间为6 h时表达量最大,占细菌总蛋白的23.62%.表达产物主要以包涵体的形式存在,将包涵体溶解后过Ni-NTA柱纯化可得到较为纯净的目的蛋白.[结论]该研究为猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)和猪皮炎和肾病综合征(PDNS)等疾病的防治奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科学院	216	2631	28.0	41.0
2	曹永长	华南农业大学动物科学院	111	1387	20.0	31.0
3	谢青梅	华南农业大学动物科学院	112	510	12.0	17.0
4	于康震	华南农业大学动物科学院	6	27	3.0	5.0