人UROC28基因真核表达载体的构建

• 作者: 吴元明 孙圣坤 洪宝发 王春杨 符伟军 陈苏民
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 克隆细胞 真核细胞 基因表达载体 载体蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 211-213
• 页数: 3页
• 分类号: R736.8|R73-3
• 字数: 1900字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人UROC28基因的真核表达载体,观察其在HEK293细胞中的表达.方法:以PUC-19-UROC28质粒为模板,扩增UROC28基因编码区的全部序列,克隆入真核细胞表达载体pcDNA3中,酶切鉴定目的基因.重组质粒用脂质体转染HEK293细胞,Western blot观察基因表达情况.结果: PCR扩增的特异性片段长度为430bp,以此构建的重组质粒pcDNA3-UROC28, 经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后显示5.4kb和430bp左右的两条片段,测序结果与GenBank中的人UROC28cds序列一致.证明UROC28因已成功克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3中.Western blot证实pcDNA3-UROC28转染HEK293细胞 24 h 后有UROC28的表达.结论:成功构建了pcDNA3-UROC28重组真核表达载体,并在HEK293细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪宝发	解放军总医院泌尿外科	199	1122	16.0	23.0
2	符伟军	解放军总医院泌尿外科	73	333	9.0	14.0
3	王春杨	解放军总医院泌尿外科	10	62	5.0	7.0
4	孙圣坤	解放军总医院泌尿外科	27	112	6.0	8.0