嗜水气单胞菌UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶的性质

• 作者: 姚火春 陆承平 龚霞
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 差向异构酶基因 克隆表达 抗原性分析
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 106-112
• 页数: 7页
• 分类号: S947
• 字数: 4876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-8737.2008.01.014

摘要

通过水生动物源性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)强毒株J-1株与弱毒株MR-1株抑制差减杂交得到gneJ差减片段,该片段与创伤弧菌(Vibrio vulnificas)和人源嗜水气单胞菌的UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶基因有较高的同源性.扩增完整的gneJ基因,进行分布检测并将其克隆至质粒pET32a(+),在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中进行异源表达,SDS-PAGE结果显示,重组表达蛋白的分子量约59.7 kD,与理论推测值基本相同.酶活性分析表明,该重组蛋白可将UDP-乙酰葡萄糖胺转化为UDP-乙酰半乳糖胺,确证gneJ基因编码蛋白为UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶.Western Blot分析显示,嗜水气单胞菌J-1株胞外产物的兔抗血清可识别该重组蛋白,表明该蛋白与天然蛋白有相同的抗原性.以重组蛋白为免疫原,对小鼠进行动物保护实验,结果显示,该重组蛋白对小鼠有60%的保护率,证明UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶可作为亚单位疫苗的侯选成分.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚火春	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	90	614	11.0	23.0
2	陆承平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	387	5495	37.0	51.0
3	龚霞	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	1	2	1.0	1.0