白芷ISSR-PCR反应体系的建立和优化

• 作者: 唐琳 郭丁丁 陈要臻 马逾英
• 来源期刊: 成都中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白芷 ISSR反应体系 建立和优化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 中药研究
• 页码范围: 45-48
• 页数: 4页
• 分类号: R282.71|R931.5
• 字数: 3735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0668.2008.02.017

摘要

目的:建立白芷的ISSR最佳反应体系及PCR扩增参数,为今后利用ISSR标记技术进行白芷鉴定及种质遗传多样性分析提供一个标准化程序.方法:以白芷基因组DNA为模板,分析了ISSR反应体系中模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度,TaqDNA聚合酶用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响.结果:建立了重复性好,分辨率高的ISSR反应体系,即在25μL反应体系中,模板DNA浓度为10～30 ng,2.5μ10×PCR buffer(Mg2+free),MgCl2 2.0 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq酶1.0U,引物0.6 pμmol/L;扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,引物在筛选后的最佳退火温度退火45 s,72℃延伸2min,共计39个循环,循环结束后在72℃延伸5 min.结论:建立了适用于白芷的ISSR反应体系.为今后利用ISSR标记技术开展白芷遗传变异分析和构建遗传图谱奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马逾英	成都中医药大学药学院	111	1471	19.0	33.0
2	唐琳	四川大学生命科学院	131	1543	20.0	33.0
3	陈要臻	四川大学生命科学院	4	48	4.0	4.0
4	郭丁丁	成都中医药大学药学院	7	131	6.0	7.0