不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节

• 作者: 冯美卿 史训龙 周珮 张金晨 黄海
• 来源期刊: 复旦学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: DAAO 重组菌表型 构建策略 表达 发酵调节
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究报道
• 页码范围: 116-119
• 页数: 4页
• 分类号: Q814
• 字数: 3112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8467.2008.01.026

摘要

目的 构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究.方法 采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发酵和调节手段,对工程菌的发酵条件进行优化.结果 获得了表型不同的3株重组菌(Muts的PDK13和PDGA10,Mut+的PDG27),它们的最佳生长条件基本相似,诱导表达条件却不相同,在Basal salts培养基内,当生长时间为36 h,诱导培养基起始pH为6.0、甲醇浓度为0.5%时,最有利于DAAO表达.在菌体密度相同的条件下,Mut+表型(PDG27)甲醇代谢快,诱导24 h,DAAO活力达到最高;Muts型(PDK13和PDGA10)甲醇代谢慢,诱导36 h,DAAO活力达最高;通气量一定时,菌体密度增加,DAAO表达量增加,菌体增加到一定程度表达量反而下降,表明通气量应随菌体密度的增大而增加.结论 Muts型重组菌对通气量要求低且更有利于高密度发酵.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄海	复旦大学药学院生物合成教研室	22	117	7.0	9.0
2	冯美卿	复旦大学药学院生物合成教研室	29	117	6.0	9.0
3	周珮	复旦大学药学院生物合成教研室	32	228	9.0	14.0
4	史训龙	复旦大学药学院生物合成教研室	13	39	4.0	5.0
5	张金晨	复旦大学药学院生物合成教研室	1	0	0.0	0.0