基于SYBR Green I的双链DNA定量方法

• 作者: 丁先锋 刘歆 徐根明 郭江峰 高晓莲
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: SYBR Green I 定量 双链DNA 基因组DNA
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 55-60
• 页数: 6页
• 分类号: Q819
• 字数: 3924字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2008.01.010

摘要

基于SYBR Green I荧光染料与双链DNA(dsDNA)结合产生荧光的原理,建立一种高精度、高通量的双链DNA 定量方法.将梯度稀释后的基因组DNA及已知浓度的λDNA与等体积的SYBR Green I(4×)充分混合后,利用荧光定量PCR仪采集荧光信号,以ROX(1×)作为校正染料进行定量分析;同时利用紫外分光光度计对样品进行平行测定,比较该方法与紫外分光光度法的检测限与准确度.紫外分光光度法的检测限为2 ng/μl,而SYBR Green I荧光定量法的检测限可达到0.015 ng/μl,并且在0.015～2 ng/μl范围内,SYBR Green I荧光强度与λDNA浓度呈线性关系(R2=0.9999),比紫外分光光度法灵敏100倍以上,并可准确定量低纯度的DNA样品.此方法具有重复性好、高通量的特点,仅需少量的生物样本即可满足定量要求,为分子生物学研究及临床检验等多个领域提供了一种可靠的dsDNA定量方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭江峰	浙江理工大学生物工程研究所	52	222	8.0	13.0
2	丁先锋	浙江理工大学生物工程研究所	44	201	9.0	12.0
3	刘歆	浙江理工大学生物工程研究所	3	56	3.0	3.0
4	徐根明	浙江理工大学生物工程研究所	2	46	2.0	2.0