miR-195重组腺病毒表达载体构建及在细胞中的表达

• 作者: 付汉江 张浩明 朱捷 汪成富 邢瑞云 郑晓飞 铁轶
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 微RNA miR-195 基因表达 腺病毒科 质粒 A549
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 319-322,361
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2008.04.006

摘要

目的:利用AdEasy系统构建miR-195的腺病毒表达载体,为研究miR-195的功能提供条件.方法:将miRNA-195前体序列从已构建的pcDNA-miR-195载体中克隆进穿梭载体pAdTrack-CMV,通过与骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中高效同源重组,获得完整的重组腺病毒质粒.利用HEK293细胞包装并扩增重组腺病毒Ad-195.Ad-195感染肺癌细胞A549后,利用miRNA的定量RT-PCR技术检测Ad-195在细胞中表达miR-195情况.随后荧光素酶报告基因实验证明,Ad-195表达的miR-195能够作用于BCL2基因上预测的miR-195靶位点.结果:实时定量PCR检测显示,Ad-195感染肺癌细胞A549后,miR-195表达水平有显著的上调.结论:miR-195的腺病毒表达载体构建成功,能够用于在细胞内过表达具有生物学功能的miR-195.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱捷	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	26	95	6.0	7.0
2	付汉江	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	26	84	5.0	6.0
3	汪成富	苏州大学生命科学学院	23	109	6.0	9.0
4	邢瑞云	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	21	123	5.0	10.0
5	铁轶	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	13	55	4.0	6.0
6	张浩明	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	2	1.0	1.0