Chemerin重组腺病毒表达载体的构建

• 作者: 张迪 杨键 杨颖 王慧 袁国跃 黄剑
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒载体 chemerin 非乙醇性脂肪肝
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 241-244,248
• 分类号: R393|R575.5
• 字数: 3464字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.03.014

摘要

目的:应用基因重组技术,构建表达chemerin基因的重组腺病毒载体.方法:经PCR方法扩增得到chemerin基因,将其插入到带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1中,得到重组质粒pShuttle-chemerin-IRES-hrGFP-1.通过酶切的方法线性化pShuttle-chemerin-IRES-hrGFP-1,并将其转化于含有pAdEasy-1质粒的BJ5183感受态细胞中,进行同源重组.得到的重组腺病毒表达载体Ad-chemerin,经Pac Ⅰ线性化后,转染AD293细胞进行扩增.通过蛋白质印迹法分析chemerin蛋白的表达.结果:得到重组腺病毒Ad-chemerin,经荧光显微镜能观察到转染重组腺病毒的AD293细胞内有绿色荧光,且出现细胞病变反应(cytopathic effect,CPE),蛋白质印迹实验检测到 chemerin蛋白的表达,从而证实重组腺病毒载体构建成功.结论:成功构建chemerin重组腺病毒表达载体,为研究chemerin的功能奠定了一定的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨颖		11	150	5.0	11.0
2	袁国跃	江苏大学附属医院内分泌代谢科	53	327	10.0	14.0
3	王慧		4	8	2.0	2.0
4	杨键		6	10	2.0	2.0
5	张迪		5	8	2.0	2.0
6	黄剑		3	4	2.0	2.0