DNA甲基转移酶3A siRNA 真核表达载体的构建和鉴定

• 作者: 单云峰 张建琼 樊红 赵主江
• 来源期刊: 东南大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA甲基转移酶3A siRNA 载体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 3626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2008.01.001

摘要

目的:构建DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferases 3A,DNMT3A)siRNA重组质粒稳定表达载体,为进一步探讨DNMT3A在多种生物学过程及肿瘤发生发展中的机制提供工具.方法:依据DNMT3A基因的cDNA序列,利用siDESIGN软件获得RNAi靶位点后设计出对应的siRNA寡核苷酸模板,体外合成寡核苷酸片段经退火形成短双链,克隆到真核表达载体pSUPER-EGFP1中,构建DNMT3A siRNA重组质粒载体,经酶切鉴定后转染人肝癌细胞系SMMC-7721,荧光实时定量PCR初步分析DNMT3A经RNA干涉后的沉默效应.结果:成功构建了靶向DNMT3A基因的siRNA重组稳定表达载体,此载体有效地降低了肝癌细胞系中DNMT3A基因的表达水平.结论:通过该方法初步确定了沉默DNMT3A基因的较佳靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊红	东南大学基础医学院遗传与发育生物学系	20	63	5.0	7.0
5	张建琼	东南大学基础医学院遗传与发育生物学系	42	104	6.0	8.0
9	赵主江	东南大学基础医学院遗传与发育生物学系	5	18	3.0	4.0
13	单云峰		9	54	3.0	7.0