杆状病毒介导的靶向DNA甲基转移酶1siRNA表达载体的构建

• 作者: 吴岩 吴莺 张尤历 徐岷 焦志军 王晓燕
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 杆状病毒载体 DNA甲基转移酶1基因 RNA干扰 胰腺癌
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 237-240
• 分类号: R393
• 字数: 3272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.03.013

摘要

目的:构建携带DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)RNAi基因的重组杆状病毒载体,以进一步研究DNMT1对胰腺癌相关基因的影响方法:首先将带有BglⅡ和Hind Ⅲ酶切黏性末端的60 bp正义和反义寡核苷酸退火,与用BglⅡ和Hind Ⅲ双酶切后的线性化载体pSUPER连接构建成pSUPER si-DNMT1-D,然后将H1启动子和RNAi序列从上述重组载体切下,插入至同样双酶切的pFastBac1载体,经过转座重组,抽提重组Bacmid DNA,转染草地贪夜蛾细胞Sf9,获得重组杆状病毒Bac-si-DNMT1-D.将上述重组杆状病毒感染胰腺癌PaTu8988细胞系,其中以重组杆状病毒r-Bac-CMV-EGFP作为阴性对照.然后运用荧光定量PCR检测DNMT1基因表达变化.结果:重组杆状病毒能够感染PaTu8988细胞,并且能显著干扰DNMT1基因表达.结论:杆状病毒表达系统可以作为RNAi载体,为以后的基因治疗开辟新的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张尤历	江苏大学附属医院消化科	122	578	12.0	17.0
2	吴莺	江苏大学附属医院消化科	55	250	8.0	13.0
3	徐岷	江苏大学附属医院消化科	93	298	9.0	11.0
4	吴岩	江苏大学生命科学研究院	22	50	4.0	6.0
5	王晓燕	江苏大学附属医院消化科	36	212	8.0	13.0
6	焦志军		1	5	1.0	1.0