口蹄疫病毒非结构蛋白2C基因主要表位区的表达及活性检测

• 作者: 付元芳 刘在新 卢曾军 张小丽 才学鹏 田美娜
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 非结构蛋白 2C基因 表达
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1235-1239
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.6|Q78
• 字数: 3252字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.09.015

摘要

根据测定的口蹄疫病毒(FMDV)2C基因序列,设计了一对特异性的表达引物,用于扩增2C基因5′-端174 bp和3′-端279 bp连接片段,该区含有较丰富的B细胞表位编码序列.扩增片段通过 NcoⅠ和SalⅠ酶切位点插入表达载体pET-30a.序列测定表明,目的基因片段连接正确,按正确的读码框插入表达载体中.重组表达质粒转化 BL21(DE3)pLys,经IPTG 诱导表达目的蛋白.表达产物经SDS-PAGE 和Western Blotting 检测表明,2C基因主要表位区成功地在大肠杆菌表达,表达产物为约23 ku的融合蛋白,能够与FMDV感染动物血清发生特异性反应,而不与健康和灭活疫苗免疫动物血清反应.该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫转印(EITB)方法提供了所需的材料.