新基因ZNFD的克隆及其多克隆抗体的制备

• 作者: 史群芳 孟祥勋 杨世蕊 王明华 雷陈 黄超群
• 来源期刊: 南通大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: ZNFD基因 锌指 原核表达 免疫抗原 多克隆抗体 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 157-160,164
• 页数: 5页
• 分类号: R394.3
• 字数: 4668字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7887.2008.03.001

摘要

目的:PCR扩增得到新基因ZNFD(Znf domain containing protein),构建pET32a-ZNFD原核表达载体,诱导蛋白表达及制备多克隆抗体.方法:通过PCR的方法克隆新基因ZNFD,选取部分抗原免疫原性较高的部分ORF序列,克隆到原核表达载体pET32a上,利用大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)表达系统表达ZNFD融合蛋白.纯化目的蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体.通过琼脂糖双向扩散实验和Western blot鉴定其效价和特异性.结果:经测序鉴定已成功克隆ZNFD基因.通过构建原核表达载体pET32a-ZNFD,在大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中使用IPTG诱导表达,得到相对分子质量约为45 kD的融合蛋白.纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强的免疫特异性.结论:得到纯化的ZNFD蛋白,制备的多克隆抗体达到了一定的效价,且具有高特异性,为进一步研究ZNFD的功能奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史群芳	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	21	1.0	2.0
2	杨世蕊	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	1	1.0	1.0
3	雷陈	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	1	1.0	1.0
4	孟祥勋	苏州大学基础医学与生物科学学院	22	414	11.0	20.0
5	黄超群	苏州大学基础医学与生物科学学院	4	28	3.0	4.0
6	王明华	苏州大学基础医学与生物科学学院	8	7	1.0	2.0