建立稳定抑制死亡相关蛋白激酶表达的细胞系

• 作者: 张海涛 汪亚君 郭黠
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 死亡相关蛋白激酶 干扰技术 表达载体法 PC12细胞
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 222-226
• 页数: 5页
• 分类号: Q291|Q782|Q784
• 字数: 2993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2008.03.004

摘要

目的 筛选稳定抑制DAPK表达的PC12细胞系,并观察这些细胞系的生长特性.方法 设计、合成4条RNA干扰序列,连接到pDsRed1-N1-U6质粒载体上,扩增后提取质粒转染到PC12细胞,并同时转染1株空载质粒作为对照,然后通过G418筛选细胞克隆,建立稳定增殖细胞系,再通过Western blot筛选最为有效的干扰序列,最后用MTT、流式细胞术等检测转染细胞系的生长特性.结果 4条干扰序列均已成功转染并筛选出单克隆细胞系,Westem blot实验结果证实,4条干扰序列中有3条对DAPK的表达有明显的抑制作用,其中以第2条干扰序列的抑制效果最为明显.结论 成功建立稳定增殖和抑制DAPK表达的细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海涛	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	64	399	11.0	16.0
2	汪亚君	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	18	122	5.0	10.0
3	郭黠	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	7	50	4.0	7.0