mOX40-Ig的表达及其生物学活性的初步研究

• 作者: 冯永堂 刘艳菲 史琳 林志娟 苗乃法 许传武
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: OX40 mOX40-Ig CHO细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 126-129
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3491字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.02.008

摘要

目的:构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,转染CHO细胞进行稳定表达,获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白.方法:RT-PCR法扩增获得hIgG1Fc段基因,构建pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒并经测序证实.从本室保存的pIRES2-EGFP-mOX40重组质粒中PCR扩增mOX40胞外段,将其插入pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒中构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体.脂质体法转染CHO细胞获得稳定表达,用RT-PCR与ELISA法检测其表达,蛋白A亲和纯化后,SDS-PAGE进行鉴定.3H-TdR掺入法研究OX40信号对B细胞的体外促增殖作用.结果:测序证实hIgG1Fc段、mOX40胞外段及mOX40-Ig基因序列正确,RT-PCR与ELISA证实mOX40-Ig的表达,SDS-PAGE证实其为mOX40-Ig融合蛋白,3H-TdR掺入法显示mOX40-Ig在体外能有效地促进B细胞增殖.结论:成功地构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,并获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白的稳定表达,为进一步开展OX40相关领域的横向应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯永堂	潍坊医学院分子免疫学实验室	34	180	5.0	12.0
2	苗乃法	潍坊医学院分子免疫学实验室	24	169	7.0	12.0
3	林志娟	潍坊医学院分子免疫学实验室	15	59	5.0	7.0
4	刘艳菲	潍坊医学院分子免疫学实验室	11	33	4.0	5.0
5	许传武	潍坊医学院分子免疫学实验室	2	0	0.0	0.0
6	史琳	潍坊医学院分子免疫学实验室	1	0	0.0	0.0