Tet-on Advanced调控人血管生素-1基因真核表达载体的构建、表达与鉴定

• 作者: 张中明 张昊 董红燕
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Ang-1 Tet-on-advanced 可调控表达载体 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1841-1844,1848
• 页数: 5页
• 分类号: R-332
• 字数: 3648字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.13.013

摘要

目的 构建pTRE-Tight-Ang-1可调控性真核表达载体,并检测其在心脏细胞中表达的可调控性.方法 巢式多聚酶链反应(nested PCR)从肺组织扩增Ang-1,测序正确后将其亚克隆入pTRE-Tight载体中,采用脂质体将pTet-on-Advanced质粒和pTRE-Tight-Ang-1共转染入新生sD大鼠心肌细胞,以不同浓度强力霉素(Dox)诱导,Westem blot检测Ang-1蛋白表达水平.结果 通过巢式PCR获得了Ang-1全长cDNA,与Genebank比对,序列完全一致.Western blot检测表明,所构建的pTRE-Tight-Ang-1可调控性表达载体能在心肌细胞内表达,表达量呈浓度依赖性.结论 该实验成功构建pTKE-Tight-Ang-1真核表达载体,在心肌细胞中的表达受DOX的调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董红燕	徐州医学院神经生物学研究中心	68	200	7.0	10.0
2	张中明	徐州医学院附属医院胸心外科	91	190	7.0	9.0
3	张昊	徐州医学院附属医院胸心外科	10	16	3.0	3.0