狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立和阳性对照的制备

• 作者: 李智涛 李玉林 沈飞 王云龙 王国强 赵瑞红
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 狂犬病病毒 假病毒颗粒
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 504-506
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2874字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2008.06.035

摘要

目的 建立狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法,制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)的假病毒颗粒阳性对照.方法 在RV的N基因保守区设计引物和探针,建立反转录实时荧光定量PCR检测方法,克隆得到噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因(MS2),将其重组到质粒pET-28b(+)中,再将RV的N基因片段重组到MS2下游,经原核表达得到RV假病毒颗粒.结果 实时荧光定量PCR检测RV重组质粒最低检测限为15拷贝/μl,重组表达质粒经原核表达可形成耐RNase的RV病毒样颗粒.结论 建立了反转录实时荧光定量PCR检测RV核酸的方法,成功构建了可耐受RNase且无传染性的RV阳性对照.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉林		35	123	7.0	9.0
2	李智涛		15	83	5.0	8.0
3	王云龙	郑州职业技术学院生物工程系	14	88	6.0	9.0
4	王国强		10	46	3.0	6.0
5	赵瑞红	河南师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
6	沈飞		1	0	0.0	0.0