TIMP-3N端结构域重组腺病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 余莹 周小华 朱云霞 朱自强 郑马庆 韩晓
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组织金属蛋白酶抑制因子-3 N端结构域 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 418-422
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.05.009

摘要

目的 构建N-TIMP3重组腺病毒载体,为深入研究组织金属蛋白酶抑制因子-3(tissue inhibitor of metalloproteinases-3,TIMP-3)N端结构域对胰腺癌的作用奠定基础.方法 PCR扩增编码人TIMP3信号肽及其N端结构域的DNA序列,定向克隆至空载穿梭质粒pShuttle-CMV,构建重组穿梭质粒pShuttle-N-TIMP3,并测序鉴定.将重组pShuttle-N-TIMP3转化BJ5183感受态细菌,与其内的腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,构建重组腺病毒载体pAd-N-TIMP3,并经酶切与PCR鉴定.将线性化的重组载体转染QBI-293A细胞包装病毒,TCID50法检测病毒滴度,用Western 印迹检测目的 蛋白的表达.结果 重组腺病毒载体pAd-N-TIMP3经鉴定正确,病毒滴度为5×108 PFU/ml,并检测到目的 蛋白的表达.结论 成功构建了重组腺病毒载体pAd-N-TIMP3.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩晓	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	38	125	7.0	10.0
2	朱云霞	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	15	26	3.0	4.0
3	周小华	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	3	12	2.0	3.0
4	朱自强	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	9	128	5.0	9.0
5	郑马庆	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	1	2	1.0	1.0
6	余莹	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	1	2	1.0	1.0