甘油脱水酶α亚基基因的克隆、表达及纯化

• 作者: 刘长江 李长彪 邵敬伟 陈永胜
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘油脱水酶 α亚基 克隆 表达 纯化 活性
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3385字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.01.006

摘要

目的 克隆甘油脱水酶α亚基基因,构建表达载体,表达并纯化融合蛋白.方法 采用PCR技术克隆甘油脱水酶α亚基gldA基因,并将其重组到含组氨酸标签的表达质粒pET-32a(+)中.将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达.表达产物经金属螯合层析柱纯化,并进行Western blot分析及活性检测.结果 重组表达质粒pET/gldA经酶切鉴定及序列分析,证明构建正确.转化E.coli BL21(DE3)后,重组蛋白获得可溶性表达,融合蛋白相对分子质量约81 000,与预期大小一致.经Western blot分析,纯化蛋白能与6-Histidine抗体产生特异性免疫反应.α亚基经检测,未显示活性.结论 已成功获得甘油脱水酶α亚基蛋白,为进一步研究其生物学性能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘长江	沈阳农业大学食品学院	255	3175	28.0	40.0
2	陈永胜	内蒙古民族大学农学院	58	286	9.0	14.0
3	邵敬伟	福州大学药物生物技术与工程研究所	24	156	8.0	12.0
4	李长彪	沈阳农业大学食品学院	37	373	12.0	17.0