克雷伯氏菌gdrA和gdrB基因的克隆、协同表达与功能鉴定

• 作者: 徐虹 韦宇拓 黄日波 齐向辉
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 甘油脱水酶 激活因子 协同表达 结构
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 字数: 3785字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2009.05.002

摘要

1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,其生物法生产的研究越来越受到广泛的关注.以克雷伯氏菌的总DNA为模板,通过PCR分别扩增出约1.8 kb的 gdrA 和 0.4 kb的 gdrB 的两个基因片段,随后,将此两基因以多顺反子的方式与 pSE380 相连构建表达载体,并在大肠杆菌中进行了高效表达,表达量约占总蛋白的30%.将高效表达的激活因子用金属亲合层析和分子筛进行了纯化,得到电泳纯级的激活因子,SDS-PAGE分析显示:大、小亚基分子量约为64 kDa和12 kDa;非变性胶分析显示:全酶的分子量约为150 kDa,扫描分析激活因子是以α2β2方式结合的.以克雷伯氏菌甘油脱水酶为研究对象,进行激活实验,结果证实该激活因子具备甘油脱水酶激活因子的功能.该研究为进一步阐明甘油脱水酶的激活机制及1,3-丙二醇的高效生产奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐虹	南京工业大学食品与轻工学院	101	1346	20.0	32.0
2	韦宇拓	广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室	83	584	14.0	20.0
3	黄日波		58	375	11.0	16.0
4	齐向辉	江苏大学食品与生物工程学院	10	64	5.0	8.0