发菜中GDP-甘露糖4,6-脱水酶基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘欢 范华 蔡国强 赵圆圆 陈雪峰
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 发菜 盐胁迫 GDP-甘露糖 4,6-脱水酶基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 31-36
• 页数: 6页
• 字数: 4287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015667

摘要

前期采用RNA-Seq技术对高盐胁迫下的发菜样品进行转录组测序,发现GDP-甘露糖4,6-脱水酶基因转录水平较正常培养条件上调2.18倍.基于转录组测序结果,通过同源相比对分析设计引物,以发菜基因组为模板克隆GDP-甘露糖4,6-脱水酶基因,获得长度为1 080 bp的核酸序列.通过生物信息学分析表明,该基因具有较高保守性,蛋白质二级结构主要构成方式为随机卷曲和α螺旋,是亲水性蛋白,酪氨酸、苏氨酸、丝氨酸磷酸化位点个数分别为13、15、17,蛋白质分子质量为41.08 ku,等电点为5.73.正负电荷氨基酸残基数分别为38和46.随后,将该基因插入质粒pET-28a中成功构建重组表达质粒,然后转化至BL21大肠杆菌感受态中进行原核表达.在OD值为0.8时,用1 mmol/L IPTG在16℃下诱导表达20 h后,获得预期大小重组蛋白(41.08 ku).该研究首次成功克隆得到发菜GDP-甘露糖4,6-脱水酶基因,并成功构建重组表达质粒于大肠杆菌高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈雪峰	陕西科技大学食品与生物工程学院	90	813	19.0	26.0
2	刘欢	陕西科技大学食品与生物工程学院	23	30	3.0	4.0
3	范华	陕西科技大学食品与生物工程学院	6	5	1.0	1.0
4	赵圆圆	陕西科技大学食品与生物工程学院	3	6	1.0	2.0
5	蔡国强	陕西科技大学食品与生物工程学院	2	3	1.0	1.0