pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)重组质粒的构建、表达及鉴定

• 作者: 刘畅 刘秀丽 刘端祺 孙林英 胡锋涛 谭晓华 邵晓婷
• 来源期刊: 华北国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,血管内皮生长因子 质粒 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5-7,封2
• 页数: 4页
• 分类号: R349.8
• 字数: 3235字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2008.04.002

摘要

目的:利用基因工程技术构建pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)重组质粒,为其应用于肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:以本实验室构建保存的pcDNA3.1 hKDR为模板,PCR扩增hKDR(Ig1-3)cDNA片段后用Nco Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后插入pmRNA IRES多克隆位点的相应位点中,经PCR、酶切和测序鉴定其序列正确性,然后用试剂盒体外转录出相应的mRNA,用脂质体转染COS-7细胞,经G418筛选后通过免疫组化和Western blot检测该融合蛋白.结果:PCR、酶切和测序证实pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)构建成功,体外转录出相应的mRNA,免疫组化和Western blot检测出其蛋白表达.结论:成功构建含pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)的真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭晓华	北京军区总医院血液科	68	344	10.0	15.0
2	刘端祺	北京军区总医院肿瘤诊疗中心	118	718	14.0	23.0
3	刘畅	北京军区总医院肿瘤诊疗中心	101	554	12.0	18.0
4	邵晓婷	北京军区总医院血液科	7	18	2.0	4.0
5	孙林英	泰山医学院医学检验系	5	11	2.0	3.0
6	刘秀丽	北京军区总医院血液科	7	25	4.0	5.0