pVEGF165-IRES-Ang-1重组质粒的构建及双基因表达研究

• 作者: 朱峰 熊成龙 罗源李
• 来源期刊: 老年医学与保健
• 学科: 医学
• 关键词: 双顺反子 质粒 骨髓间充质干细胞 血管生成素-1 血管内皮细胞生长因子165 同源蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 384-388,426
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4704字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8296.2014-09

摘要

目的 探讨pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cell,MSC)中表达的情况,为下一步的动物实验奠定基础.方法 构建插入人血管生成素-1(angiopoietin,Ang-1)和人血管内皮细胞生长因子165 (vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)双顺反子的pIRES重组质粒,经脂质体转染大鼠MSC,以实时荧光定量PCR技术分析各基因人源、鼠源以及总mRNA的动态变化.结果 所构建的pVEGF165-IRES-Ang-1双顺反子重组质粒在大鼠MSC中成功表达了相应蛋白.人VEGF165得以高丰度表达,且在转染1d后mRNA检出的拷贝数最高;人Ang-1在4个检测时间点中的mRNA拷贝数比较稳定,但转录本的拷贝数较VEGF 165显著降低;转入人Ang-1和人VEGF 165后,各对应同源蛋白的总mRNA有显著增加,但大鼠MSC自身Ang-1与VEGF164的编码mRNA明显有下调趋势.结论 pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒双基因表达量明显不一致,表现为受插入的位置关系影响,且可能受转染细胞内同源蛋白的总量调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊成龙	复旦大学公共卫生学院	11	28	4.0	4.0
2	罗源李	江西省吉安市遂川县人民医院急诊科	1	0	0.0	0.0