银鲫HIRA多克隆抗体的制备及组织特异性表达分析

• 作者: 周励 桂建芳 王玉凤
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 银鲫 HIRA 抗体制备 组织表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 页码范围: 354-359
• 页数: 6页
• 分类号: Q344+.13
• 字数: 4364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2008.03.010

摘要

Hir/Hira基因家族的成员广泛存在于多种生物体中,但有关其在生物体发育过程中的具体功能还不甚清楚.对果蝇的研究表明,dHira基因产物可能在受精时精核的解凝过程和雄性原核的正常形成过程中起重要作用.本研究组前期已经分别克隆出雌核发育银鲫和两性生殖彩鲫的Hira基因(cagHira 和caHira),本实验在银鲫cagHira基因的特异区域,设计一对引物,以银鲫成熟卵母细胞总RNA逆转录出的cDNA为模板,扩增出cagHira的特异片段.再将该片段克隆到原核表达载体pET-32a上,转化BL21(DE3)菌株,经诱导后表达出融合蛋白.分析表明,该融合蛋白主要以包涵体形式表达.以纯化的融合蛋白作为抗原去免疫小鼠,制备多克隆抗血清,经蛋白质印迹分析检测,该抗血清(稀释到1:2000)与包涵体蛋白识别反应良好,确定获得了具有高效价的特异性银鲫CAGHIRA多克隆抗体,为进一步研究HIRA在鱼类发育和雌核生殖过程中的作用奠定了基础.对银鲫HIRA蛋白的组织特异性表达分析发现,该蛋白仅在成熟卵巢组织中特异表达,故表明HIRA可能对鱼类卵子发生和/或早期胚胎发育具有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉凤	华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室	53	529	14.0	20.0
2	桂建芳	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	118	1687	24.0	35.0
3	周励	华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室	1	3	1.0	1.0