Sonic hedgehog蛋白N端基因片段毕赤酵母表达载体的构建

• 作者: 时纪元 李兆中 金晶 高军 龚燕芳
• 来源期刊: 中华胰腺病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒 DNA,重组 毕赤酵母 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 44-46
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2008.01.016

摘要

目的 构建含Sonic hedgehog(SHH)蛋白N端基因片段的毕赤酵母表达载体.方法 通过BamH 1、Xho 1双酶切、T4连接酶连接,将SHH-N基因片段插入pET22b原核表达载体,构建pET22b-SHH-N质粒;经PCR扩增,产物再与pTA2载体连接,构建pTA2-SHH-N重组质粒;经EcoR 1及Not 1双酶切、T4连接酶连接,将SHH-N端基因片段插入pPIC9K质粒,构建pPIC9K-SHH-N重组质粒;通过线性化、脱磷酸化,将线性化pPIC9 K-SHH-N DNA转染毕赤酵母菌株GS115,最后经PCR扩增和测序鉴定.结果 转染的毕赤酵母经PCR扩增和测序证实含有SHH-N基因片段,与原始的基因片段序列完全一致.结论 成功地构建含SHH-N蛋白基因片段的毕赤酵母表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚燕芳	第二军医大学长海医院消化内科	120	602	12.0	17.0
2	高军	第二军医大学长海医院消化内科	91	287	9.0	10.0
3	金晶	第二军医大学长海医院消化内科	47	145	7.0	8.0
4	李兆中	第二军医大学长海医院消化内科	11	32	4.0	5.0
5	时纪元	第二军医大学长海医院消化内科	1	0	0.0	0.0