阴道毛滴虫黏附蛋白65基因的克隆、表达及免疫反应性鉴定

• 作者: 梁韶晖 潘长旺 王雪玲 蔡敏 黄慧聪
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 阴道毛滴虫 AP65 疫苗
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 404-407
• 页数: 4页
• 分类号: R382.2
• 字数: 3667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.05.004

摘要

目的 通过构建原核表达载体,获得阴道毛滴虫黏附蛋白65基因重组融合蛋白.方法 分离并纯化培养阴道毛滴虫临床分离株,提取其总RNA,经RT-PCR扩其全长序列基因,T-A克隆测序后,连接表达载体PET-28a(+).在E.coli(DE3)Plyss宿主菌中用不同浓度IPTG诱导目的蛋白的表达,采用Ni-NTA亲和层析法提纯AP65,SDS-PAGE检测表达和提纯效果.采用兔抗阴道毛滴虫全虫多抗鉴定其免疫反应性.结果 克隆ap65基因与GenBank公布基因同源性高,在1mmol/L IPTG诱导下,AP65产量可占细菌总蛋白量的23%,提纯后蛋白纯度达到90%以上,且重组蛋白AP65能与兔抗阴道毛滴虫全虫抗体发生特异性结合.结论 成功地构建了阴道毛滴虫ap65基因的原核表达系统,重组蛋白且有良好的免疫反应性,可为疫苗抗原的筛选及单克隆抗体的制备奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘长旺	温州医学院寄生虫学教研室	64	412	11.0	17.0
2	梁韶晖	温州医学院寄生虫学教研室	35	179	9.0	11.0
3	黄慧聪	温州医学院寄生虫学教研室	41	198	10.0	12.0
4	蔡敏	温州医学院寄生虫学教研室	6	16	3.0	4.0
5	王雪玲	温州医学院寄生虫学教研室	2	8	2.0	2.0