3-羟酰基辅酶A脱氢酶在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

• 作者: 徐闯 沈冰蕾 王长远
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 3-羟酰基辅酶A脱氢酶 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 263-265
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2249字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆并在大肠杆菌中表达3-羟酰基辅酶A脱氢酶(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase,HCDH)并制备其抗血清.方法:通过PCR方法扩增HCDH基因片段,经DNA测序证实后克隆到原核表达载体pMAL-P2X,重组质粒转化大肠杆菌DE3,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果,经麦芽糖树脂亲和纯化的蛋白皮下注射免疫獭兔,琼扩和ELISA检测抗血清的效价,Western blot检测其特异性.结果:PCR扩增得到786 bp的目的片段,序列测定证实与GeneBank上登录的序列一致;成功构建了HCDH基因片段的原核表达载体;在详细探索表达条件的基础上,成功诱导HCDH的表达,并制备了相应的抗血清.结论:检测HCDH蛋白在表达水平上的变化及为HCDH基因表达调控的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈冰蕾		38	47	4.0	5.0
2	王长远		98	544	12.0	21.0
3	徐闯		115	398	9.0	14.0