小鼠Ipr1基因与EGFP基因融合表达载体的构建及其在鼠巨噬细胞中的表达

• 作者: 帖儒修 朱道银 李娜 王瑜伟
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Ipr1基因 结核病 绿色荧光蛋白 定位
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 231-233,237
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11|R378.911
• 字数: 3834字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.03.008

摘要

目的: 构建小鼠胞内病原体抗性基因1(Ipr1)基因与EGFP基因融合表达载体, 观察小鼠Ipr1基因在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中的表达.方法: 从C57BL/6J小鼠胸腺组织提取总RNA, 以RT-PCR法调取Ipr1基因编码序列, 克隆至pEGFP-C1载体中, 筛选阳性克隆作PCR、酶切及测序鉴定后得到pEGFP-Ipr1, 脂质体瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7, 以空质粒pEGFP-C1转染组作为对照.采用RT-PCR法检测Ipr1的RNA水平表达及用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的表达及细胞内定位.结果: 扩增出小鼠Ipr1基因编码序列, 经PCR、酶切及测序鉴定证明得到正确的重组质粒pEGFP-Ipr1, 脂质体瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7得到了成功表达, Ipr1基因表达产物定位于细胞核内.结论: 成功地调取小鼠Ipr1基因, 构建了小鼠Ipr1基因与EGFP基因融合表达载体并在小鼠巨噬细胞株RAW264.7得到了成功表达.Ipr1编码蛋白定位于细胞核内, 提示其是一种调节蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱道银	重庆医科大学免疫学教研室	113	510	10.0	15.0
2	李娜	重庆医科大学免疫学教研室	63	261	9.0	11.0
3	帖儒修	重庆医科大学免疫学教研室	8	14	2.0	3.0
4	王瑜伟	重庆医科大学免疫学教研室	15	21	3.0	3.0