小鼠巨噬细胞Ipr1基因真核表达载体的构建及表达

• 作者: 何永林 张黎 朱道银 李娜
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: Ipr1 结核病 真核表达载体 pQE-TriSystem
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 216-219
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.03.007

摘要

目的 构建小鼠Ipr1(intracellular pathogen resistance 1)基因真核表达载体.方法 从C57BL/6J小鼠胸腺组织提取总RNA,以RT-PCR法调取Ipr1基因编码序列,克隆至pMD19-T simple载体中,转化大肠杆菌JM109,筛选的阳性克隆作PCR及酶切鉴定后测序分析.其中的突变碱基经点突变修复后将Ipr1基因亚克隆于原核真核双系统表达质粒pQE-TriSystem中得到pQE-TriSystem-Ipr1,用脂质体瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,RT-PCR鉴定Ipr1基因的表达.结果 从C57BL/6J小鼠胸腺组织内扩增出大小为1 338bp片段.阳性克隆测序鉴定发现一个点突变,经点突变修复后与GenBank报道的Ipr1基因序列一致.亚克隆获得重组质粒pQE-TriSystem-Ipr1,转染RAW264.7细胞经RT-PCR扩增出Ipr1基因相应大小的DNA片段.结论 成功调取小鼠Ipr1基因并成功构建含Ipr1基因的真核表达载体,为进一步研究Ipr1基因的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张黎	重庆医科大学免疫学教研室	58	140	6.0	8.0
2	朱道银	重庆医科大学免疫学教研室	113	510	10.0	15.0
3	何永林	重庆医科大学免疫学教研室	49	129	6.0	7.0
4	李娜	重庆医科大学免疫学教研室	63	261	9.0	11.0