含人p27基因的重组腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 何文涛 吴柯 徐逸 曾宁 朱舟 陈忠华 陈曦林
• 来源期刊: 中国康复
• 学科: 医学
• 关键词: p27 腺病毒 细胞周期 慢性移植肾失功
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 医学康复
• 页码范围: 226-228
• 页数: 3页
• 分类号: R49|R617
• 字数: 2349字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1001-2001.2008.04.003

摘要

目的:构建并鉴定含有人p27基因和EGFP基因的重组腺病毒载体,并观察其表达.方法 利用腺病毒载体系统Adeno-X,通过质粒抽提、电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术,构建重组腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP;酶切、PCR鉴定重组腺病毒质粒;利用293细胞包装重组腺病毒载体PAd-p27-EGFP,通过荧光倒置显微镜观察EGFP的表达.结果:经酶切和PCR鉴定,成功构建重组腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP,利用脂质体转染人293细胞后,转染腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP可见EGFP表达和细胞致病效应(CPE).结论:利用腺病毒载体系统Adeno-X成功构建含CMV启动子的Flag-p27和EGFP基因的腺病毒载体,为进一步研究细胞周期调控与慢性移植物失功之间的关系,并为寻找慢性移植物失功的基因治疗的途径奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱舟	华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所	43	158	7.0	11.0
2	陈曦林	华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所	6	9	2.0	3.0
3	徐逸	华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所	24	61	4.0	6.0
4	吴柯	华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所	3	12	2.0	3.0
5	何文涛	华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所	14	29	3.0	5.0
6	曾宁	华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所	4	7	2.0	2.0
7	陈忠华		1	0	0.0	0.0