一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白多克隆抗体制备

• 作者: 周玉 张竹君 易维京 李淑慧 李鹏 杨明珍 胡川闽
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: IRF-4结合蛋白 原核表达 蛋白纯化 快速免疫法 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1242-1245
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33|R392.11|R392.8
• 字数: 3101字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.13.008

摘要

目的 获得一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白(IRF-4-binding protein,IBP)的高效价特异性多克隆抗体.方法 通过生物信息学分析选择IBP特异片段(1228～1893 bp),目的 片段cDNA插入pET32a和pGEX-KG原核表达载体,分别转化B1221感受态细菌,IPTG诱导表达后组合应用阴离子交换层析、His、GST亲和层析技术获得免疫原(pET32a/IBP融合蛋白)及检测原(pGEX-KG/IBP融合蛋白).HPLC鉴定纯度.利用改良快速免疫法获得兔抗IBP多克隆抗血清,井经蛋白A柱纯化,非特异性扰体吸收.间接ELISA检测抗体滴度、Western blot和免疫组化实验检测抗体特异性.结果 表达并纯化的pET32a/IBP融合蛋白纯度达92%,pGEX-KG/IBP融合蛋门纯度达87%.IBP多克隆抗体滴度达1:51 200,能特异地和内源性IBP结合.结论 成功表达并纯化了 IBP融合蛋白,制备了高滴度、高特异性的抗IBP多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李鹏	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	67	677	9.0	24.0
2	胡川闽	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	56	209	7.0	11.0
3	易维京	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	19	81	6.0	8.0
4	周玉	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	5	75	3.0	5.0
5	李淑慧	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	42	315	9.0	16.0
6	张竹君	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	10	45	4.0	6.0
7	杨明珍	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	9	32	3.0	5.0