CTX-M型阴沟肠杆菌的基因克隆及原核表达产物特性研究

• 作者: 廖伟娇 徐韫健 李乃健 江洁华
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CTX-M型 克隆 重组质粒 酶动力学
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 1004-1008,1027
• 页数: 6页
• 分类号: R378.2
• 字数: 4034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2008.10.003

摘要

目的 对阴沟肠杆菌所产CTX-M型β-内酰胺酶进行基因克隆、原核表达重组质粒的构建及其特性研究.方法 以产CTX-M型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌45号基因组DNA为模板,设计两对引物PCR扩增CTX-M,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列.再将CTX-M基因克隆到pGEX-6P-3表达质粒并转入感受态BL21,选择阳性菌落进行药物敏感试验和酶动力学检测.结果 PCR扩增出大小为876 bp和1 067 bp的基因片段,与GenBank上CTX-M-9和CTX-M-3酶的基因序列同源性为100%.CTX-M-3型重组菌株药敏试验结果 与原菌株相比,对青霉素类和头孢噻肟具有明显的水解作用,第三、四代头孢菌素对之较为稳定,动力学结果与酶稳定性结果基本一致.结论 重组质粒pGEX-6P-3/CTX-M构建成功,CTX-M-3型重组菌株与原菌株比较,对β-内酰胺类抗生素的敏感性和稳定性增加,亲和力下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐韫健	广州医学院第一附属医院检验科	55	285	9.0	13.0
2	廖伟娇	广州医学院第一附属医院检验科	98	542	12.0	17.0
3	江洁华	广州医学院第一附属医院检验科	31	267	8.0	15.0