钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32的克隆、表达及应用于致病性钩体免疫血清的检测

• 作者: 严延生 张志珊 徐国英 李世清 潘敏楠 王灵岚 邓艳琴
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 外膜蛋白基因 基因表达 致病性
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 391-394
• 页数: 4页
• 分类号: R377
• 字数: 3140字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.05.001

摘要

目的 选取钩端螺旋体黄疸出血群(56601株)外膜脂蛋白LipL32进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于致病性钩体检测的纯化重组蛋白.方法 用PCR法扩增黄疸出血群(56601株)外膜脂蛋白LipL32基因,与表达载体pET-30a连接并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白,免疫印迹(WB)鉴定活性后用电洗脱法进行纯化.将纯化的重组蛋白用间接和夹心ELISA法应用于22株兔免疫血清的检测,检测结果与钩体显微镜凝集试验(MAT)进行比较.结果 重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白,WB结果显示重组蛋白具有免疫活性.纯化的重组蛋白对15株钩体标准致病株兔免疫血清全部检出,对7株腐生性钩体株兔免疫血清全部未检出,与MAT检测结果相符.结论 黄疸出血群(56601株)外膜脂蛋白LipL32基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白可应用于致病性钩体血清抗体的检测,为研制致病性钩体抗体检测试剂奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严延生		161	1086	15.0	24.0
3	王灵岚		48	282	9.0	13.0
4	张志珊		9	38	4.0	6.0
5	李世清		17	82	6.0	7.0
6	邓艳琴		33	162	6.0	11.0
7	徐国英		22	67	5.0	7.0
9	潘敏楠		13	34	4.0	5.0