钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32的重组表达及纯化

• 作者: 孙岩松 战大伟 杨敬 范薇 隋丽华
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 外膜蛋白 重组蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 420-423
• 页数: 4页
• 分类号: R377.5
• 字数: 3390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.05.006

摘要

目的:构建L32-pQE32重组质粒,诱导表达重组钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32,对重组蛋白进行纯化.方法:采用PCR法从钩端螺旋体DNA中获取编码LipL32的基因片段,构建重组克隆载体pGEM-T/L32和表达载体L32-pQE32,转化受体菌E.coli DH5α和E.coli M15,IPTG诱导表达重组LipL32蛋白.Ni-NTA亲和层析纯化重组LipL32蛋白.结果: 扩增出约750 bp的LipL32成熟蛋白基因,LipL32基因插入pQE32表达载体,表达产物6个组氨酸与LipL32蛋白的融合蛋白相对分子质量约为31 000,与预期大小一致.Western印迹显示能与钩体抗血清特异结合.结论:LipL32蛋白能在大肠杆菌中表达,Ni-NTA亲和层析可有效纯化重组LipL32蛋白,重组LipL32蛋白具有结合活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨敬	军事医学科学院实验动物中心	30	191	8.0	12.0
2	孙岩松	军事医学科学院实验动物中心	61	434	12.0	18.0
3	范薇	军事医学科学院实验动物中心	23	88	6.0	8.0
4	隋丽华	军事医学科学院实验动物中心	32	203	9.0	13.0
5	战大伟	军事医学科学院实验动物中心	23	152	7.0	11.0