问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因的构建及其表达产物免疫性的鉴定

• 作者: 严杰 周金成 罗冬娇
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 问号钩端螺旋体 lipL32 基因 lipL41 基因 融合基因 构建/表达 免疫性
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 427-432
• 页数: 6页
• 分类号: R383.1
• 字数: 1804字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.05.002

摘要

目的 构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性.方法 采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/2融合基因,常规方法构建其原核表达系统.采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL41/2表达情况.采用Western blot鉴定rLipL32/1-LipL41/2的免疫反应性.采用ELISA检测228例钩体病人血清中lipL32/1、lipL41/2基因和lipL32/1-lipL41/2融合基因表达产物的抗体.结果 lipL32/1-lipL41/2融合基因核苷酸和氨基酸序列与报道的相关序列相似性分别为99.9%和99.8%.rLipL32/1-LipL41/2表达量约为细菌总蛋白的10%.rLipL32/1和rLipL41/2兔抗血清均能识别并与rLipL32/1-LipL41/2结合.97.4%、78.5%和99.1%病人血清rLipL32/1、rLipL41/2和rLipL32/1-LipL41/2抗体阳性.结论 本研究成功地构建了问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统,rLipL32/1-LipL41/2不仅同时具有两个单一重组抗原的免疫反应性,且能提高钩体病人血清中抗体检测阳性率,可作为研制钩体属特异性基因工程疫苗或检测试剂金的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学教研室	265	1149	14.0	20.0
2	罗冬娇	杭州师范学院基础医学院	52	209	9.0	11.0
3	周金成	杭州师范学院基础医学院	12	22	3.0	4.0