DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立

• 作者: 位全芳 何凤田 刘洋 周虎传 曾益军 李劲 李杰 杨劲 赵谦
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA聚合酶iota HEK-293细胞 DNA损伤 DNA修复.
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1267-1269
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|Q813
• 字数: 2755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2008.07.023

摘要

目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polι)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆.结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.