SV40T抗原真核表达载体的构建及其在食管癌细胞EC9706中的表达鉴定

• 作者: 张钦宪 杜春艳 谢庆瑞 陈辉 马慧洁
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: SV40T抗原 转染 真核载体
• 年，卷（期）: 2008,（26）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 39-41
• 页数: 3页
• 分类号: R735.2
• 字数: 2880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.26.015

摘要

构建胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV和非特异性表达载体pcDNA3.1(-)/SV,行酶切及测序鉴定.用脂质体转染法将构建的载体导入食管癌细胞EC9706细胞株,RT-PCR法检测SV40T抗原基因的表达,免疫组化法检测蛋白表达情况. 结果限制性内切酶分析与测序结果示H+/K+ATP酶β亚基启动子与SV40T基因成功构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体中;转染细胞提取基因组DNA及总RNA,分别经PCR和RT-PCR反应扩增出618 bp和272 bp的特异性片段,非特异性表达载体pcDNA3.1(-)/SV瞬时转染时SV40T抗原表达阳性,而特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV转染组蛋白表达阴性.认为构建特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV并在食管癌细胞EC9706中检测其表达为转基因肿瘤动物模型的建立奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈辉	郑州大学基础医学院	58	208	8.0	12.0
2	张钦宪	郑州大学基础医学院	126	523	10.0	15.0
3	谢庆瑞		3	42	1.0	3.0
4	马慧洁	郑州大学基础医学院	4	2	1.0	1.0
5	杜春艳	郑州大学实验动物中心	3	5	1.0	2.0