SV40T抗原真核表达载体的构建及表达

• 作者: 乐晓萍 张艳 张钦宪 陈辉 马慧洁
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: SV40T抗原 胃癌 真核载体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 231-234
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 字数: 2854字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.02.014

摘要

目的:构建SV40T抗原的特异性真核表达载体,并导入胃癌细胞株SGC7901进行表达鉴定.方法:扩增小鼠H+/K+ATPase β亚基启动子,与pMT18-T载体相连,并将其亚克隆至真核表达载体 pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)/HK; 从含有SV40T基因的pLITAg质粒酶切回收SV40T基因,与pcDNA3.1(-)/HK相连,构建胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV,同时构建非特异性表达载体pcDNA3.1(-)/SV,进行酶切及测序鉴定.用脂质体转染的方法将构建的载体导入胃癌细胞株SGC7901,PCR扩增基因组DNA,RT-PCR检测SV40T mRNA的表达.结果:限制性内切酶分析与测序结果显示,真核表达载体pcDNA3.1/HKSK构建成功;转染该载体的SGC7901细胞可检测到SV40T基因DNA的存在,且有SV40T mRNA的表达.结论:特异性表达SV40T基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈辉	郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室	58	208	8.0	12.0
5	张钦宪	郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	126	523	10.0	15.0
6	张艳	郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	344	1424	18.0	23.0
10	乐晓萍	郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	30	82	6.0	7.0
11	马慧洁	郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	4	2	1.0	1.0