三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究

• 作者: 张利峰 张念之 段向英 蒋一男 许建明
• 来源期刊: 检验检疫科学
• 学科: 农学
• 关键词: IHNV VHSV SVCV TAQMAN MGB探针 三重实时荧光RT-PCR
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S941.41

摘要

鱼传染性造血器官坏死病病毒（Infectious hematopoietic necrosis virus IHNV）、鱼病毒性出血性败血症病毒（Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV）和鲤春病毒血症病毒（Spring viraemia of carp virus SVCV）是同属弹状病毒科（Rhabdoviridae）的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒。通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的Taqman MGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记。以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法。通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量。同时,该方法还对病毒混合感染EPC细胞（Epithelioma papulosum cyprini）和攻毒斑马鱼进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法。