大豆MYB转录因子GmMYBZ2的鉴定、突变分析及原核表达

• 作者: 刘蕾 吴燕民 唐晓凤 唐益雄 杜海 赵艳丽 高杰 黄玉碧
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: MYB转录因子 突变 酵母单杂交 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 301-306
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 5187字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.02.020

摘要

大豆(Glycine max)CanMYBZ2基因是典型的植物R2R3-MYB转录因子家族成员之一.通过DNAMAN和酵母(Saccharomyces cerevisiae)单杂交系统分别对其蛋白结构和转录活性进行了分析鉴定,并在大肠杆菌(Eschenchm coli)中进行了原核表达.GmMYBZ2除含有典型的R2R3-MYB转录因子的结构特征外,在C端含有1个少有的保守氨基酸基序PDLNLELTIS及一个隐藏的锌指结构.基因组序列分析表明,在263～395 bp位含1个132 bp的内含子.为明确GmMYBZ2C端保守氨基酸基序及锌指结构对目的蛋白转录活性的影响,分别进行了PCR介导的序列删除突变.酵母单杂交系统分析显示,内含子、保守基序及锌指结构对目的蛋白的转录活性均有抑制作用;原核表达显示,目的蛋白能在补充有稀有密码子的大肠杆菌中成功表达.